树突状细胞（DC细胞）与T细胞的相互作用在肿瘤治疗中起着至关重要的作用。研究表明，骨髓来源的DC细胞（BMDCs）可以诱导CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型的产生，从而增强生殖道局部肿瘤的控制能力。此外，半乳糖酸的阻断进一步提升了BMDCs诱导抗原特异性CD8+T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析显示，仿硅酸处理BMDCs可以诱导与T细胞活化、细胞粘附和细胞间相互作用相关的基因表达差异。

细胞聚类与单细胞嗜性测量结果表明，糖基化减少的BMDC与CD8+T细胞之间存在更为强烈的嗜性相互作用。在DC细胞完成抗原呈递后，相关的协作功能和调控机制在CD8+T细胞的激活以及靶细胞的杀伤过程中表现得尤为重要。当前的研究热点之一是探讨活化CD8+T细胞的记忆功能分群变化与其细胞内乳酸化、棕榈酸化等代谢过程之间的关系。

为了评估CD8+T细胞的杀伤功能，本期我们将提供关于DC细胞活化的CD8+T细胞以及评估CD8+T细胞杀伤能力的解决方案。以下是实验方法与结果展示。

实验原理简介

DC细胞被认为是最强的抗原呈递细胞（APC），能够摄取消化外源抗原并通过MHC分子将其递呈给CD4+和CD8+T细胞，从而引发免疫反应。共培养DC细胞与CD8+T细胞是模拟体内CD8+T细胞激活的最佳方法，因而成为CD8+T细胞相关研究不可或缺的模型方案。在共培养时，通过T细胞受体（TCR）与DC细胞上的抗原肽-MHCⅠ复合物结合来激活CD8+T细胞。

活化后的CD8+T细胞（即细胞毒性T细胞）通过释放溶解介质（如穿孔素和颗粒酶）对靶细胞实现杀伤，或通过与靶细胞Fas受体结合，启动凋亡程序。相关文献指出，这种机制对于优化肿瘤免疫治疗有着重要的启示。

实验结果展示

DC细胞的体外培养与促成熟实验显示：通过流式细胞术检测，经过促成熟和成熟诱导后的DC细胞在MHCII、CD80、CD40及CD86的表达上显著升高。通过EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit，我们从C57小鼠脾脏中分选出纯度高的CD8+T细胞。同时，通过灭活的靶细胞（Raw2647）负载抗原后与CD8+T细胞共培养72小时，成功检测到CD8+T细胞增殖。

在检测CD8+T细胞对靶细胞的杀伤能力时，将增殖后的T细胞与靶细胞按照1:10的比例共培养24小时，流式细胞术结果表明，靶细胞中Caspase3的酶活性显著增加，表明凋亡比例增高。此外，ELISA检测显示，与对照组相比，共培养组的细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α表达明显增高。

实验方案及操作流程

DC细胞的体外培养与促成熟：取小鼠骨髓细胞，使用分化培养基培养6天，随后转入成熟培养基培养24小时，即可获得成熟的DC细胞。详细操作请参阅“Mouse Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDC) Induction and Identification Kit”。

为实现细胞杀伤检测，首先将活化处理后的靶细胞（Raw2647）与成熟的BMDC以1:1比例共培养24小时，随后收集细胞并进行适当的离心和重悬。CD8+T细胞采用EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit进行分选，并通过CFSE染色以追踪细胞增殖。经过共培养后，最终评估各个细胞群体的状况。

本实验使用的产品来自人生就是博-尊龙凯时，确保实验结果的准确性与可靠性。如需了解更深入的实验细节，欢迎与我们技术团队联系。感谢您的关注与支持！